玉米赤霉烯酮免疫亲和柱

玉米赤霉烯酮免疫亲和柱

简介
ZEN免疫亲和柱适用于基质复杂、**要求低的样品中玉米赤霉烯酮检测的净化。可以进行TLC、HPLC、GC、LC-MS/MS、EIA的定量分析，适用于谷物，食品，饲料等的样品净化过程。
储存条件：2 8 冷藏保存， 不可冷冻
1、用途：用于实验室净化样品提取物以进行进一步分析
2、概要：玉米赤霉烯酮首先从有赤霉病的玉米中分离得到 玉米赤霉烯酮其 产毒菌主要是镰刀菌属的菌 株玉米赤霉烯酮主要污染玉米、小麦、大米、大麦、小米和燕麦等谷物 。
玉米赤霉烯酮具有雌激素作用，能造成动物急慢性中毒，引起动物繁殖机能异常甚至死亡 对人类的健康也造成很大威胁。**对食品，饲料中的玉米赤霉烯酮都有严格的**标准。
3、原理：测定的基础是抗原抗体反应，免疫亲和柱中含有和玉米赤霉烯酮抗体结合在一起的凝胶， 样品中的玉米赤霉烯酮经过提取、过滤、稀释，然后缓慢的通过免疫亲和层析柱，在免疫亲和柱内 玉米赤霉烯酮 与抗体结合， 其他的无关物质不会结合而直接通过免疫亲和柱， 之后洗涤免疫 亲和柱除去没有被结合的其他无关物质。 最后加入甲醇将玉米赤霉烯酮 释放， 然后注入到分析仪器中 进行进一步的检测。
4、产品信息
货号、规格、数量、柱容量
C14003、1mL、25支、≥500ng
C15003、3mL、20支、≥750ng
C15007、3mL、20支、≥1500ng
C15207、3mL、100支、≥1500ng
5、操作者应注意事项：
⚫ 玉米赤霉烯酮对人体有害，应戴手套操作。
⚫ 使用过的玻璃容器及玉米赤霉烯酮溶液较好用5%浓度的次氯酸钠溶液浸泡过夜。
⚫ 不要使用过了有效日期的免疫亲和柱。
⚫ 亲和柱于2 8 冷藏保存，不可冷冻。
⚫ 使用前，免疫亲和层析柱需回至室温 22 25 ℃）。
6、操作流程
⚫ 粉碎好的样品过20 目筛并在取样前彻底混合，不立即分析的样品应放在冰箱中储存。
⚫ 称取20g 粉碎样品及4g 氯 化钠，加入100mL90% 乙腈/水。
⚫ 高速均质约5 分钟，或震荡器震荡约30 分钟。
⚫ 4000转离心5min或普通定量滤纸过滤。
⚫ 取5mL 滤液加入20mL 纯水，彻底混合用玻璃纤维滤纸过滤至澄清
⚫ 将10mL 注射器连接于免疫亲和柱上端。
⚫ 取处理好的样液10mL10mL（相当于0.4g 样品）以1 2滴/秒的速度通过免疫亲合柱，弃掉流出的液体。
⚫ 加10mL 水淋洗柱子两次，弃掉流出的液体。
⚫ 利用真空设备压入空气或用注射器吹干柱中水分。
⚫ 加入1mL 甲醇缓慢洗脱，流速约为2 3 秒每滴。
⚫ 收集全部洗脱液于干净的比色皿或其他容器中用于检测。
*粮谷类样品用水稀释，发酵类或杂质干扰很大的样品提取液，则用20mMPBS进行更大倍数的稀释（一般为10倍），以确保亲和柱中玉米赤霉烯酮抗体与样品提取液中抗原特异性结合的能力不受影响。
*20mMPBS：0.62g NaH 2 PO 4 •2H 2 O + 5.73gNa 2 HPO 4 12H 2 O+9g NaCl ，蒸馏水溶解并定容至1000 mL ，调 PH 至 7.4 。

7、操作流程图操作流程图

8、液相色谱测定条件液相色谱测定条件
⚫ 液相色谱柱：C18柱（柱长150mm，柱内径4.6mm；填料粒径5μm），或相当者；
⚫ 荧光检测器：激发/发射波长：274nm/440nm
⚫ 流动相：乙腈-水-甲醇（46+46+8）
⚫ 流速：1mL/min
⚫ 进样量：20μL
⚫ 柱温：35℃
用进样器吸取玉米赤霉烯酮标准工作液注入高效液相色谱仪，在上述色谱条件下测定标准溶液的响应值（峰 高或峰面积），得到玉米赤霉烯酮标准溶液高效液相色谱图。


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